[問題] 關於 yeast two-hybrid vector

看板Biotech作者 (蒼天之月)時間18年前 (2007/07/02 00:49), 編輯推噓0(0推 0噓 0→)
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最近在接 yeast two-hybrid 用plasmid 用的vector是pGBKT7 7.3kb map:http://0rz.tw/9d2My 接一個1.2kb的insert 切位 pst1 bamH1 PCR後單切 膠回收 再單切 再膠回收 接的時候先45度C Denature Vector insert 再跟據跑膠ban的亮度去決定比例 total 20 ul 然後10~16度C 水浴 O/N 隔日transform到 DH5a 的E.coli中表現 講了這麼多....反正就是接不進去 學長說可能是因為vector很長所以兩端接不太到~~ 有克服的方法嗎?? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 125.231.122.166
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