Re: [求救] 關於Cy5的發光機制
試著解釋一下,有錯請指正
Cy5受紅光激發之後,如果再持續照射,那麼在photobleaching
之後會形成radical-electron 或是 radical-hole pair
這就是該paper裏所稱的dark state (請注意這並非原來的original state)
而如果再對處於dark state的Cy5照射大約300-532nm的光
並且加上一個electron/hole donor (也就是Cy3在此扮演的角色)
就可以讓Cy5重新被激發到fluorescent state
(所以如果Cy3距離Cy5太遠,doner效果就不好,Cy5就不容易被重新激發)
這稱之為Cy5的reversible optical switch特性
要釐清的一點是
這個特性底層的原理是photoinduced electron transfer (PET)
而不是FRET
PET的有效作用距離比FRET更短, 兩者的kinetics pattern也不一樣
最後補充一點
雖然目前知道Cy5具有這樣的特性
但是對於此特性在分子結構上的形成原理還沒有定論
Reference: JACS (2005) 127:3801-3806
※ 引述《amnesiachick (;l;l)》之銘言：
: 有幾個跟Cy5有關的問題 希望知道的人能夠給點指點^^
: Red laser light that produces fluorescent emission from Cy5 can also
: switch the dye to a stable dark state. Exposure to green laser light
: converts Cy5 back to the fluorescent state, but the recovery rate
: depends critically on the close proximity of a secondary dye, Cy3.
: 主要是有關這一段的問題.在看到這篇paper以前我認知中的Cy5是照紅光就會亮,
: 然後就一直亮到它photobleach為止.所以我看不懂為什麼red laser會
: "switch the dye to a stable dark state".而且這裡green laser的存在目的是什麼呢?
: 如果不照green laser, 一直照red laser, Cy5就不會再亮了嗎?
: "green laser light converts Cy5 back to the fluorescent state",
: fluorescent state不是指excited state嗎?可是在paper裡面照綠光的
: 時候是沒有emission的. 這幾部分我真的很疑惑.
: 另外請問Cy3跟Cy5之間的距離會影響recovery state的問題,這應該從哪個角度去解釋呢?
: 因為我查相關資料,裡面也只是提到這個現象,但並沒有詳細解釋為什麼?
: 拜託大家了^^
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※ 編輯: nightcatman 來自: 163.1.159.199 (04/13 18:48)
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