Re: [問題]有關cloning 選用的tag
是Taq 不是Tag
taq類都沒有proof reading 的功能
有proof reading功能的是pfu
但是pfu沒有會在PCR產物末端加上A的特性
A要自己另外加上去
通常用taq類的話, 就是接上去後在定序確認啦
※ 引述《showx2.bbs@bbs.sa.ncyu.edu.tw (MIMIMOMO毛毛和我)》之銘言：
: 我是大學部菜鳥
: 因為前一陣子用plantium tag、Extag做PCR得到我的產物
: 與p-blue、PGEMT ligation
: 但是藍白篩的結果白色菌落都沒有得到insert
: 總共重複做了數十次依樣沒有結果
: 現在boss叫我用violet試試看(我的vector是PGEMT easy vector)
: 但是violet不是沒有proof reading的功能嗎
: 這樣該如何做轉殖
: 我有查過相關資訊，應該是如果insert有接近去後
: 得到定序結果
: 只有功能性的序列沒有問題就可以轉殖
: 但是要如何確定他哪些是功能性的序列
: 請教各位老手了~~
: 感恩喔
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