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作者 Ritoo 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共13則

限定看板：Biotech

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[ Biotech ]33 留言, 推噓總分: +4

作者: Ritoo - 發表於 2012/06/04 16:02(13年前)

2^F→Ritoo:我template的濃度10 ng/ul，PCR是使用EconoTaq kit，裡面的06/04 16:26

3^F→Ritoo:MgCl2是3 mM06/04 16:27

4^F→Ritoo:所以是可以試試看調整MgCl2的濃度嗎06/04 16:27

6^F→Ritoo:有用nanodrop重測過其一樣品，濃度達一千多ng/ul06/04 18:24

7^F→Ritoo:260/280約1.8，260/230約2.206/04 18:24

8^F→Ritoo:測的樣品都已經轉成cDNA了06/04 18:25

13^F→Ritoo:我在處理細胞的習慣上，都是當天早上抽RNA，下午轉cDNA和跑06/04 18:55

14^F→Ritoo:膠，如果已經轉成cDNA也是有斷掉的可能性嗎？06/04 18:56

15^F→Ritoo:另外，我也有擔心cDNA反覆解凍的問題所以在第6點有以另批轉06/04 18:56

16^F→Ritoo:的cDNA進行測試，不過結果一樣是smear06/04 18:57

17^F→Ritoo:上述的跑膠是跑RNA膠片確認品質，轉cDNA與PCR膠片則後續進行06/04 18:58

29^F→Ritoo:我是直接抽取細胞的RNA，此target mRNA目前的cycle數是4006/04 23:29

30^F→Ritoo:我明天試試看提高cycle數，感謝各位！06/04 23:29

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