作者查詢 / licat
作者 licat 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共55則
限定看板:Biotech
看板排序:
7F推: 就我之前測試手邊Lp菌株,小體積時搖不搖沒差的05/18 11:59
8F→: 但增殖很慢這點不正常05/18 11:59
2F推: 查有沒有適合的酵素切位把amp gene切掉 接別的進去就好05/01 11:51
3F推: 在加PK前 溶液應該還是混濁的 PK作用完後會變澄清09/01 22:03
4F→: 就你觀察 有這樣嗎?09/01 22:04
8F推: binding buffer 成份是? 原始protocol有說加入後要離心嗎?09/02 11:52
9F推:放一般培養箱養就可以了,broth不用搖養一天,agar plate養06/29 15:54
10F→:兩天06/29 15:54
1F推:DNA序列有差異的話就絕不是同一菌株了 但要小心定序出錯問題12/03 01:02
2F→:照你提的目的 感覺直接將50段定序完序列去跑演化樹就結束了12/03 01:09
11F推:沒有DE3的話都不能用 有DE3的host則都有一試的價值07/01 19:31
12F→:因為有時理論是理論 哪個host適用你的蛋白質還真不試不知道07/01 19:33
13F推:實驗室常用的E. coli分為K12與B strain兩種07/01 19:34
14F→:BL21是屬於B strain, 常用於cloning的都屬於K1207/01 19:37
15F→:因此是可以用XL1-blue(DE3)試試看的 我自己有同時做過07/01 19:38
16F→:同一個pET表現質體 在這兩個host中 表現量有很大差異07/01 19:39
1F推:XL1-blue(DE3)也是pET系統常用的host strain之一06/28 09:35
2F→:pET系統主要是跟T7 promoter以及DE3有關 建議細讀一下手冊06/28 09:38
6F推:看你的描述我可以想到好多可能的問題... 我覺得最快的方法是04/09 21:57
7F→:找一個你附近作cloning很順的人 跟他一步步確認你的做法04/09 21:58
8F→:最好是可以請他幫你做 全照他的方式來做 然後你在旁邊看跟學04/09 21:58
7F→:一次切割兩種以上酵素是可行的 只是要注意buffer相容性04/05 19:16
8F→:不大確定你的定序方式是?04/05 19:17
9F→:一般的定序方式只能確認大概1 kb片段吧04/05 19:18
10F→:而且無法確認你接進去的方向性是否正確 等等問題04/05 19:19
13F→:了解~04/05 19:25
1F→:先問甚麼是15kb之譜的質體?04/04 23:43