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討論串[請益] [生化實]請問大家收蛋白質要作western …
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#5
Re: [請益] [生化實]請問大家收蛋白質要作western …
推噓2(2推 0噓 1→)留言3則，0人參與, 最新作者metalbi (真有趣)時間19年前 (2006/11/27 00:36), 編輯資訊
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真是感謝您詳細的解說. 我目前的情況是這樣：. 我想看的蛋白是p-proteins. 所以lysis buffer裡面含有phosphatase inhibitor是可以接受的. 但是我想看的pathway裡頭有 PP2A 而且他是在蠻上游的地方. 所以我才會想到 phosphatase inhib
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#4
Re: [請益] [生化實]請問大家收蛋白質要作western …
推噓3(3推 0噓 5→)留言8則，0人參與, 最新作者biolenz (lenz)時間19年前 (2006/11/25 16:18), 編輯資訊
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收蛋白 (萃取蛋白) 首先要看你是用什麼細胞，. 植物跟動物跟細菌都不太一樣。. 所謂 lysis buffer 裡頭可能含有一些 detergent 或是 enzyme. 前者打破細胞膜，後者打破細胞壁 (像植物或是細菌). 至於 buffer 系統，PBS、Tris、Tricine、HEPES
(還有1176個字)
#3
Re: [請益] [生化實]請問大家收蛋白質要作western …
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者aggaci (學鋼琴，左手怎麼那麼笨)時間19年前 (2006/11/25 00:19), 編輯資訊
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你都已經要破細胞了，你還擔心在細胞要破不破的時候還進行什麼反應嗎?. 再快也沒那麼快吧...... --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From: 140.114.100.165.
#2
Re: [請益] [生化實]請問大家收蛋白質要作western …
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者metalbi (真有趣)時間19年前 (2006/11/24 20:02), 編輯資訊
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沒加的話 磷酸根都被phosphatase給殺掉 那麼會看不到p-protein的表現. 但是. 若某個phosphatase參與我想探討的pathway呢?因為有inhibitor所以把我想探討的. phosphatase給抑制了 造成整條pathway有問題. 這樣也不對呀. --. 找板請到以
#1
Re: [請益] [生化實]請問大家收蛋白質要作western …
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者aggaci (學鋼琴，左手怎麼那麼笨)時間19年前 (2006/11/24 17:50), 編輯資訊
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sample buffer? lysis buffer?兩者不一樣功能吧?!. phosphatase inhibitor加這個就是要將蛋白質的phosphatase都抑制掉. 想想妳若是要做phospho-protein的話，沒加會如何. --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆
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