跑膠的問題

看板CSMU-LS89作者 (撰寫國王的論文ing)時間20年前 (2006/03/17 11:19), 編輯推噓7(7推 0噓 7→)
留言14則, 4人參與, 最新討論串1/3 (看更多)
我是用2%的agarose跑ssDNA 有時候會很不幸的出現整條都是smear 囧rz 請問要怎麼避免掉smear的出現啊 問題是出在PCR的過程還是跑電泳的過程？（還是製膠的過程？） <(_ _)> 剛溫 -- ◤ ◥ ◣▲◢ ◤≡.◥ 蜘蛛人 ◣╳◢ 益rz ﹀▲﹀ 老人家 ═ ═ ◣＿ ◢▲ ◥皿 ◤▲ "︷\│▲ ◤ ◤ ◤ ◤ ◤ ◤ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.15.161.237
推
03/17 11:57, , 1F
PCR...GEL不太可能有問題...
03/17 11:57, 1F
推
03/17 15:35, , 2F
有一批Gel好便宜阿...
03/17 15:35, 2F
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03/17 16:40, , 3F
所以是哪裡的問題？＠＠？
03/17 16:40, 3F
推
03/17 16:57, , 4F
primer TM值沒橋好...primer dimer太多...
03/17 16:57, 4F
推
03/17 17:04, , 5F
看錯...sample跑膠前加熱denature一下怎樣...
03/17 17:04, 5F
推
03/17 17:38, , 6F
有沒有可能是第三步驟extension的時間不夠?
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03/17 17:39, , 7F
有的人會把annealing跟 extension 合併
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03/17 17:40, , 8F
但是如果 template的length > 250bp 就會來不及聚合反應
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推
03/17 17:47, , 9F
它的是ssDNA跑膠...你可以試試用acrylamide跑看看..
03/17 17:47, 9F
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03/17 17:48, , 10F
可能是解析度不夠吧...阿災...
03/17 17:48, 10F
推
03/17 17:57, , 11F
心虛問一下，因為有時候有出來有時候沒出來
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03/17 17:58, , 12F
如果純技術問題的話會是哪裡出問題啊 ＠＠
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03/17 17:58, , 13F
我已經盡量每次loading時都很專心了
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03/17 17:59, , 14F
我說錯了，應該是跑dsDNA ><" 對不起
03/17 17:59, 14F
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文章代碼(AID): #146YhSdP (CSMU-LS89)
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