討論串[求救] Hif1 alpha看不到band
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推噓3(3推 0噓 5→)留言8則,0人參與, 最新作者jas123654 (jack)時間10年前 (2013/08/27 00:16), 編輯資訊
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如標題. 小弟目前要針對hif1 alphe做western. 但是一直看不到band. 只有加了CoCl2的positive control有強烈的band. control(什麼藥物都不加). 以及加藥組(加Fascaplysin)的完完全全沒有band. 小弟實驗室在收lysate是先加PBS
(還有268個字)

推噓1(1推 0噓 4→)留言5則,0人參與, 最新作者xiphos (火柴人@@)時間10年前 (2013/08/27 02:58), 編輯資訊
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不知道您是用哪種方式進行hypoxic treatment?. 如果是用hypoxia chamber的話收lysate的時間就需要越短越好. 我的作法是先用足量的cold PBS很快的wash過一次,然後直接將lysis buffer加到culture plate中將細胞打破後再把lysate收下
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