討論串[求救] 請問RNA去除genomic DNA的方法
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推噓1(1推 0噓 0→)留言1則,0人參與, 最新作者mattmatt (乎哩乎哩￾ N￾ N￾ )時間14年前 (2011/09/30 22:41), 編輯資訊
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分享一些經驗:. 我們實驗室有在做植物與微生物(真菌). 使用的植物種類算一算有十幾種. 菌也有三四種以上. 抽RNA的方法不外乎TRIzol, spin column, ammonium carbonate. 使用起來真的是要看樣本來調整. 像TRIzol很容易受到多醣, 二次代謝物, 和水分的影
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推噓2(2推 0噓 3→)留言5則,0人參與, 最新作者lovenainai (lovenainai)時間14年前 (2011/09/29 16:07), 編輯資訊
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如果要做 qPCR 用 TRIzol 抽的 RNA 非常容易有gDNA汙染. 用 DNAse 處理並不好 因為加溫過程中 RNA 會 degrade 得很厲害. 而且你的 buffer 跟 DNAse 都還留在裡面. 我覺得用 Lithium Chloride 沉澱拿到的 RNA 最純 便宜 又快速
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推噓1(1推 0噓 0→)留言1則,0人參與, 最新作者huuban (冰酒瓶子)時間14年前 (2011/09/29 01:32), 編輯資訊
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提供一點經驗分享囉... 之前有碰過類似的問題. 我們家處理的是植物樣本. TRIzol、RNAzol是完全不能抽的狀態.... (買了一瓶TRIzol放在那裡沒人用..有人想拿東西來換的話歡迎喔> <). 不過後來換到一個不錯的系統,目前是可以抽得不錯. 所以樣本很重要. 當然板大們說的,用途也是
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推噓2(2推 0噓 8→)留言10則,0人參與, 最新作者Rarelay時間14年前 (2011/09/28 23:17), 編輯資訊
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其實也沒有很貴XD. (我們是減量到一組可以用 120 rx'n,這樣一個反應在 30 元左右). (這個版應該可以大約的說一下價錢吧?!). 他的 DNA 活性很好,而且 inactivation reagent 中加有防止 RNA 降解的物質,. 所以效果就更好了。. 這玩意兒真的不大好用。.
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推噓1(1推 0噓 5→)留言6則,0人參與, 最新作者chiehdis (chiehhime)時間14年前 (2011/09/28 22:32), 編輯資訊
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或許你可以搜尋我ID(小寫a + chiehdis) 看一下是不是類似的問題. 如果是的話 相關回文可以看一下 那篇作者很厲害 幫助我很多~~. 另外 基於如何去除gDNA又保持RNA不被降解~提供給你一些我查到的方法:. <<DNase>>. 我們家本來用Ambion Turbo ~. 方法是加入
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