討論串[求救] 去除SDS方法
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推噓1(1推 0噓 0→)留言1則,0人參與, 最新作者skylawer (skylawer)時間14年前 (2011/06/04 17:27), 編輯資訊
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如果你是用 in gel digestion 的方式. 基本上你用 SDS elution 是不會有問題的. 你之前想辦法要去除 SDS 後. 後來還是要加 sample buffer, 跑 SDS PAGE,. 這些 SDS 還是回來了. 有關量的問題. ㄧ般只要是用 Commassia blue
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推噓0(0推 0噓 1→)留言1則,0人參與, 最新作者chosenone (獲選者)時間14年前 (2011/06/03 13:45), 編輯資訊
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把濃縮的步驟在跑SDS-PAGE前完成最簡單. 可以把蛋白質沉澱再以少量SDS-PAGE的sample buffer回溶 煮完直接load gel. 也可以用MICROCON或其他KIT來完成. 和MS相比SDS-PAGE可以容忍較多不純物存在而不會干擾結果. 跑完SDS-PAGE染色再取點做in
(還有250個字)

推噓4(4推 0噓 8→)留言12則,0人參與, 最新作者xenosaga1026 (sam)時間14年前 (2011/06/02 17:29), 編輯資訊
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目前實驗設計是要用IP的方式將目標protein抓下來. 跑SDS-PAGE後挖點. 再用Mass的方式來看interaction protein. 因為使用的是culture cell (293T). 怕IP下來的protein量太少Mass會打不到. 所以目前打算將protein從protein
(還有128個字)
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