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討論串[求救] Purification fungi genomic DNA
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#3
Re: [求救] Purification fungi genomic DNA
推噓0(0推 0噓 7→)留言7則，0人參與, 最新作者MrCAKE (Keep Working)時間16年前 (2010/03/21 02:17), 編輯資訊
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我以前常抽絲狀真菌的DNA和RNA. 你說的牛樟芝我也有抽過. 我覺得你應該先告訴大家你如何得知DNA量太少. 以及老闆如何判斷片段太小. DNA的用途為何?(如果只是要PCR 事實上隨便抽抽就可以了). 如果不提供這些資訊的話 真的很難幫上你的忙. --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc
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#2
Re: [求救] Purification fungi genomic DNA
推噓1(1推 0噓 5→)留言6則，0人參與, 最新作者Fourfish (～四條魚～)時間16年前 (2010/03/20 12:37), 編輯資訊
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雖然我之前抽的都是動物的gDNA.... 但我怎麼覺得你的步驟怪怪的??. 你的過程怎麼會做兩次沈降？（步驟6、12）. 照我所知的原理跟抽動物的經驗. 應該把步驟10. protease K跟3. extration buffer並在一起處理 煮65度 for 3hr. （目的是破細胞跟切掉pro
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#1
[求救] Purification fungi genomic DNA
推噓2(2推 0噓 1→)留言3則，0人參與, 最新作者ko363630 (打雜路人甲)時間16年前 (2010/03/20 12:17), 編輯資訊
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老闆最近要我抽牛樟芝的gDNA. 我從自家的分生聖經以及學姐之前的做法下去做. 雖然有很成功的抽出來. 但是濃度卻是相當低，老闆說，可能是抽的時候DNA被切碎太多. 但是我自己覺得不太可能，可能是牛樟芝用的量太少(取1g抽). 這是我們的實驗步驟. 1.濾紙抽氣過濾(無菌水清洗). 2.液態氮研磨.
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