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討論串[求救] 小片段的DNA分離
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#4
Re: [求救] 小片段的DNA分離
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者hsd0時間18年前 (2008/02/21 12:50), 編輯資訊
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那能不能在說一下你切完之後所有片段的大小呢. 因為姑且不論這個長時間的電泳..... (可能是我做太少實驗 我平常也是跑那個大小左右的gel. 但是我都是用50V or 100V 最多最多跑一個小時半就可以看了). 一條從gel上面切下來的single band. 純化之後check又出現雜band
(還有37個字)
#3
Re: [求救] 小片段的DNA分離
推噓1(1推 0噓 0→)留言1則，0人參與, 最新作者umbrally (成長)時間18年前 (2008/02/21 11:24), 編輯資訊
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這個片段是原本接在puc18上. 用限制酵素切出這個片段之後. 用11cm*14cm 的膠 17V跑. 然後照膠的時候看起來我要的片段已經和puc18分開. 所以可以把我要的片段的那條band切下來. 之後純化 可是純化完 再取一點點去測試純不純. 就會發現上面還有其他的band 就是我說的不乾淨.
#2
Re: [求救] 小片段的DNA分離
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者hsd0時間18年前 (2008/02/21 00:28), 編輯資訊
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能不能稍微一下這個600多bp的DNA是什麼之後的product呢?!. 因為其實不太懂您所說的"不乾淨"是什麼意思. 是指做完純化之後check會有其他的band嗎??. 還有我想請問一下你跑的是多大片的膠呢 是普通像是名片的寬度的gel嗎??. 因為聽你說用17V跑感覺上不像是一般實驗室那種只有
#1
[求救] 小片段的DNA分離
推噓2(2推 0噓 7→)留言9則，0人參與, 最新作者umbrally (成長)時間18年前 (2008/02/20 14:20), 編輯資訊
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我要分離小片段的DNA(約六百多bp). 使用洋菜膠跑電泳來分離. 之前使用的是 1%或1.4%的濃度. 用17V跑大約18個小時. 但是 當把band切下來純化出DNA後. 再去跑電泳測試純不純時 往往都不乾淨. 於是就要再純化個第二次第三次. 到最後東西都沒了~~~~~. 所以想請教一下 這種小
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