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討論串[問題] RFLP~
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#4
Re: [問題] RFLP~
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者shuyanc (趕快做出來吧！)時間18年前 (2007/05/05 18:16), 編輯資訊
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其實如果不放心的話，酵素可以多放一些啦！. 但 EcoRI 會有 star activity. 使用時需注意 glycerol 濃度小於 5% (加入之酵素量小於總體積的十分之一). pH<8.0 (使用酵素附的 buffer 就是了). --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ F
#3
Re: [問題] RFLP~
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者pneumonia.時間18年前 (2007/05/04 22:09), 編輯資訊
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※ 引述《kaifish.bbs@ptt.cc (喔.....................)》之銘言：. > ※ 引述《mona210 (喔屋)》之銘言：. > : PCR 所得到的 DNA 片段中一個EcoRI的切割位置，而某噬菌體中有五個EcoRI切割位置，> : 那我應該加入多少體積酵素才
(還有449個字)
#2
Re: [問題] RFLP~
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者kaifish (喔.....................)時間18年前 (2007/05/04 11:34), 編輯資訊
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你的酵素是跟NEB買的嗎?. 根據NEB的酵素unit的定義是. 1 U = digest 1ug DNA in an hour. 所以基本上如果你想在一小時內將你的實驗DNA完全切割. 取 1 U 應該夠(換句話說就是 0.1 uL). --. 我不想在球場上當一個沒用的人. 也許我真得不是很厲害
#1
[問題] RFLP~
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者mona210 (喔屋)時間18年前 (2007/05/04 11:31), 編輯資訊
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PCR 所得到的 DNA 片段中一個EcoRI的切割位置，而某噬菌體中有五個EcoRI切割位置，. 那我應該加入多少體積酵素才能在一小時內把1μg實驗用的DNA給完全切割?. ( EcoRI酵素濃度約為10 U/μl ). 我想要知道怎麼算..... 因為自從上次那個"初學者問題". 有時對自己會有
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