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討論串[問題] PCR夾GC rich region
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#3
Re: [問題] PCR夾GC rich region
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者kuan.時間18年前 (2007/04/21 22:57), 編輯資訊
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你可以試著添加一些cofactor來幫助實驗的進行,如常使用的DMSO(final conc. 5%),. 我之前也有做過68度的,加了DMSO的產率有增加,遇期的片段大小也符合(618 bp). try it!. wish you can success!!. --. ╭─ Origin ─╗ 新
#2
Re: [問題] PCR夾GC rich region
推噓1(1推 0噓 0→)留言1則，0人參與, 最新作者dropdred (keep the faith)時間18年前 (2007/04/19 18:37), 編輯資訊
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來跟大家報告一下進度. 老闆拿了一組叫做FailSafe Premix Selection Kit. 好像是波斯特在賣的吧. 裡頭有12種premix. 據說明書上寫...就是MgCl2跟Betaine濃度上的差異. 然後...我用60度去跑. 12種都試. 有...就是那個band.... 再其中
#1
[問題] PCR夾GC rich region
推噓6(6推 0噓 1→)留言7則，0人參與, 最新作者dropdred (keep the faith)時間18年前 (2007/04/17 18:29), 編輯資訊
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最近在夾GC rich的位置,約80%. amplicon約650bp. primer是用primer3設計的,Tm=60度. 試過AmpliTaq, 在60度跟touchdown會夾出約300bp的片段. 但在升溫上去68度就什麼都沒有了...連殘存的primer都看不見. 另外,還試了Ampli
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