[方法] drug-resistant cell line

看板Biotech作者 (Fait votre père)時間6年前 (2017/08/09 23:39), 編輯推噓2(2015)
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我們實驗室有篩選出來的gemcitabine-resistant cell line 我想問 在maintain cell line 時我們會加drug 1. 但如果要單純比較parental vs gemcitabine-resistant cell line在不同環境 例如starvation vs hypoxia vs FBS的某個protein表現 做實驗有需要加gemcitabine嗎? 老闆說因為這個是篩選出來的 所以就像stable cell line 做實驗不需要加gemcitabine 2.在gemcitabine-resistant cell line 想看某個gene是不是對於resistance很重要 所以我就利用gemcitabine-resistant cell line去用virus knock down實驗後 加puromycin去篩選 請問這時需要也加gemcitabine一起去篩選嗎? 如果puromycin+gemcitabine 可是這樣篩會不會導致引起其他gene誘發resistance? 感謝 -- 開封有個~包莖舔 鐵面吾吃,被中姦 登了登了 登登登(音效 推 godispower:江湖豪傑,來家住 王朝和馬漢在輪姦~~登了登了登登登 lase:鑽洞鼠 抽事後煙 登了登了登登登 peopleselbow:撤地鼠 是個癡漢 XYZdragon:金毛鼠 一生癡漢 登了登了登登登 beLIEve:穿山鼠嗚嗚 舔奶油犬 pp6372:這五鼠 一起進來 goodtour:翻江鼠 吼別郎幹 newsph:吃洨和吾液 流傳在民間 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.116.189.59 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1502293140.A.F1A.html

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1.我覺得要加,不過安心起見要加不加可以一起比較
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你不知道加了會不會有影響,可是突然不加也是一樣
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多一組平行比較一下看看
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2. 都要加,就是抗雙藥物而已,篩藥本就有可能篩到抗
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藥的細胞,用single cell比較沒這個問題,不過也會被
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質疑嵌入的序列,所以要多挑幾顆
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感謝
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反正是cell line..這次不作, 以後reviewer也會問
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用puro篩出活下來的細胞,會是puro sensitive嗎?
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同樣的,KD的時候加gem,可以篩出gem-resistant gene KD?
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你一開始這個cell line是transient還是stable clone?
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08/10 23:37, , 12F
resistant cell line 是篩出來的
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"stable cell line 做實驗不需要加gemcitabine"??是嗎???
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08/13 12:27, , 14F
為什麼我學到的要加
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maintain會 但如果要做gemcitabine的影響會加
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但如果我想看microenviroment對resistant cell line
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就不會
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文章代碼(AID): #1PYooKyQ (Biotech)
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