Re: [求救] PCR 結果一直不理想或沒東西

看板Biotech作者boblu (六百)時間7年前 (2017/02/17 02:15)推噓3(3推 0噓 7→)

留言10則, 4人參與討論串2/2 (看更多)

你如果只是要鑑別你的 transgenic mice 身上帶的 transgene 是 A or B 好像不需要 PCR 全長吧？不是說中間有 400 bp 差異比較大？那就針對這個區域設計 A specific 跟 B specific 的 primers 啊每一隻老鼠的 genomic DNA 拿來跑針對 A 以及針對 B 的兩個 PCR 看哪個有跑出來就知道誰是誰目標 400bp 容易 PCR 而且這樣連 sequencing 都免了甚至你可以利用 A 與 B 在那 400 bp 以外的區域高度相似的特性把 primer 設計成 AB-F(universal), A-R, B-R 三個並設計成 AB-F + A-R 以及 AB-F + B-R 的產物 size 不同三個 primer 放一個 PCR 反應跑看產物大小就完成 genotyping 的目的惹 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 198.137.20.209 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1487268948.A.242.html

→

Ianthegood

02/17 06:18, , 1^F

02/17 06:18, 1^F

推

taya1991

02/17 08:14, , 2^F

02/17 08:14, 2^F

推

taya1991

02/17 12:51, , 3^F

02/17 12:51, 3^F