[求救] Dual-Luciferase 的 Internal control

看板Biotech作者 (翼天)時間12年前 (2013/07/22 21:27), 編輯推噓1(100)
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請教一下, 由於我所使用的 promoter/enhancer 屬於較弱的類型, 之前教我 Luciferase assay 的老師是建議是把我想研究的基因的 promoter/enhancer 接到 pGL3-promoter-vector 上, 利用上面的 SV40 early promoter 增強 ffLuc 的訊號。 現在我遇到一個問題, 如果我懷疑我的實驗操作也有可能會影響到那段 SV40 early promoter, 也因此每做一次實驗我都還要做 pGL3-promoter-vector 的 control。 我想問的是: 我能不能把 pGL3-promoter-vector 上的 ffLuc 換成 rLuc, 用這個 rLuc 當作 internal control 去消除實驗操作對 SV40 early promoter 的影響? 同時 transfect 這兩個有許多相同序列的 plasmid 到細胞內, 會不會影響我的實驗結果? PS: 原本用的 internal control 是實驗室自己做的用 UbC promoter 表現的 rLuc。 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 120.126.39.30

07/22 23:11, , 1F
呃...co-transfect不會有promoter competittion嘛??
07/22 23:11, 1F
文章代碼(AID): #1HxJDNEj (Biotech)
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