Fw: [實驗]HPLC mobile phase的peak

看板Biotech作者 (さとし)時間11年前 (2013/01/22 23:58), 編輯推噓1(106)
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※ [本文轉錄自 Chemistry 看板 #1G_hOROC ] 作者: Peetu (さとし) 看板: Chemistry 標題: [實驗]HPLC mobile phase的peak 時間: Tue Jan 22 23:53:57 2013 最近在使用HPLC分析高分子聚合物(polypeptide) 第一次使用HPLC,想請教一個問題 我的column是size exclusion chromatography mobile phase是PBS detector是用RI 在進樣前已經有將base line歸零穩定了 然而我的sample進樣後,RT在10分、15分與18分時都會出現peak 打一針空針(only mobile phase),peak只在15、18分鐘出現 可想而知我的sample應該是在10分鐘出現的那個peak 我的問題是,為什麼15、18分鐘時,會出現訊號呢? 其他人好像都說因為mobile phase本身也會有訊號 但我在進樣前已經將訊號穩定,訊號呈現水平,mobile phase是一樣的 沒道理再打一針mobile phase就會在15、18分鐘出現訊號 打一針純水也會出現一樣的訊號.... 但是換了mobile phase後,訊號就不同了 想請問一下,這是什麼原因呢?? 謝謝 -- ┌── ◢█""─┐┌─── "" "◥─┐┌── ◢██◣ ─┐ ╔═════@▂▂▂▂ ◤◥██ ONEPIECE ●◥●◥ ◥█ 師香 ◥◥ ζ 草帽海賊團 "◢ 員索 ╲ 冊─◢◣ 3 ◢ @═════╝< ── 隆 ㄟ/██\<|::|╯ ψyang0515 └── ─┘└──── ─┘└── | ▂ | ─┘ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.138.155.68 ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ※ 轉錄者: Peetu (140.138.155.68), 時間: 01/22/2013 23:58:50

01/23 11:57, , 1F
請問你有打sample buffer嗎?
01/23 11:57, 1F
sample buffer的是指溶sample的buffer嗎? 我用的是水,有打過了,跟打MP是一樣的結 果@@ ※ 編輯: Peetu 來自: 140.138.155.68 (01/25 00:48)

01/25 04:29, , 2F
如果你打水跟打MP圖是一樣的話..那15/18分鐘的東西
01/25 04:29, 2F

01/25 04:30, , 3F
就是汙染..因為水跟PBS差在PBS有鹽類..理論上打水的話
01/25 04:30, 3F

01/25 04:31, , 4F
應該會有負吸收的peak (因為用PBS當MP的話..打一個沒有)
01/25 04:31, 4F

01/25 04:32, , 5F
鹽的東西..RI detector認為介質反射有差..應該有peak
01/25 04:32, 5F

01/25 04:33, , 6F
除非你LC軟體有設定把negative peak自動轉成一般的peak
01/25 04:33, 6F

01/25 11:44, , 7F
把管線,取樣針頭好好清潔一番試試.
01/25 11:44, 7F
文章代碼(AID): #1G_hSxuo (Biotech)