[求救] plasmid 問題

看板Biotech作者 (vconquer)時間13年前 (2012/12/14 23:56), 編輯推噓6(6推 0噓 13→)
留言19則, 9人參與, 最新討論串1/3 (看更多)
請各位原諒小妹我才疏學淺 最近抽plasmid後跑膠 都會出現smear的情形 請問有什麼樣的問題 難道是膠品質問題 (因marker 也怪怪的) 還是elution solution太髒 菌 是前兩天剛從-80畫到plate上 昨天養今天抽的 請各位高手相助 非常感謝 拜託 -- Sent from my Android -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 180.177.3.103
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12/15 00:26, , 1F
跟別人借點膠來跑跑就知道是否是膠了
12/15 00:26, 1F
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12/15 01:41, , 2F
抽plasmid用的菌量會不會太多!?
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12/15 02:09, , 3F
plamid有沒有先linearize才跑膠？用幾%的膠跟plasmid的
12/15 02:09, 3F
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12/15 02:09, , 4F
大小也有關
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12/15 08:29, , 5F
我是用0.8 % 膠來跑
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12/15 08:31, , 6F
沒有切成線性 但之前都不會這樣 菌量太多要怎麼分辨？
12/15 08:31, 6F
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12/15 09:48, , 7F
你抽plasmid的菌 養的時間跟使用量 會影響菌量
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12/15 09:48, , 8F
有時候菌量過多 會造成一些genomic DNA被抽到
12/15 09:48, 8F
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12/15 09:49, , 9F
這只是臆測 最好是能有膠圖給大家看 不然跟隔空抓藥
12/15 09:49, 9F
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12/15 09:49, , 10F
一樣 最快的方式 是配新的膠跟用新的marker重跑一次
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12/15 09:50, , 11F
先確定是抽出來的plasmid有問題
12/15 09:50, 11F
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12/15 14:57, , 12F
你的膠該不會是用水泡的?
12/15 14:57, 12F
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12/15 16:27, , 13F
用水泡？？？ 好等我回學校補上圖
12/15 16:27, 13F
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12/15 21:24, , 14F
我有碰過，抽plasmid的kit有問題時，跑膠都smear。
12/15 21:24, 14F
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12/16 16:50, , 15F
marker也有問題可能是膠沒凝好就跑 也會拖成一片
12/16 16:50, 15F
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12/17 00:38, , 16F
請問a大 你kit是那個藥品有問題？
12/17 00:38, 16F
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12/18 11:45, , 17F
有加RNase嗎？如果沒有，你看到的是RNA smear
12/18 11:45, 17F
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12/22 00:46, , 18F
沒加 但一般抽會加嗎?
12/22 00:46, 18F
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12/28 05:46, , 19F
一般kit都會加吧 摻在第一罐buffer裡面
12/28 05:46, 19F
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