Re: [方法] Heat-induced epitope retrieval
提供個人使用的方法作為參考:
加熱方式主要有兩種
1. 微波,最強火力,10-20分鐘
2. autoclave,一般滅菌條件,10-20分鐘
不過也看過有人用hotplate,直接把燒杯的水煮滾,再隔水加熱,10-20分鐘
buffer有三種
1.Tris-EDTA (pH 9.0)
Tris 10 mM
EDTA 1 mM
可配10X stock solution備用
這個buffer可以讓染色比較深,但是同樣會得到比較髒的background
2.sodium citrate (pH 6.0)
sodium citrate 10 mM
3.citric acid buffer (pH 6.0)
citric acid 10 mM
無論用哪一種buffer,都可以考慮在裡面加 0.05% Tween-20
記住,正確的pH值非常重要。
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