[方法] Heat-induced epitope retrieval

看板Biotech作者 (姓消名遣字無聊)時間13年前 (2012/12/09 02:36), 編輯推噓4(4推 0噓 4→)
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最近在嘗試免疫染色, 一直染不太上去. 雖然懷疑抗體本身有問題, 老師確很肯定的說抗體沒問題. 問題有可能在過度的固定. 那麼, 就得操作所謂的Heat-induce epitope retreival 請問這邊有人有這方面的經驗嗎? 聽說就是把切片放進去特別的溶液中煮一煮?! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 114.47.160.151
推
12/09 17:20, , 1F
上網antigen retreival 很多捏
12/09 17:20, 1F
推
12/11 08:48, , 2F
antigen retrieval本來就是IHC的關鍵步驟，不同的抗體、組織
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以及固定方式，都需配合不同的retreival方式。
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推
12/11 11:25, , 4F
FFPE的切片, 都要經過antigen retrieval的步驟
12/11 11:25, 4F
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12/11 11:27, , 5F
不同的抗體有不同的方式, 看看說明書裡有沒有說囉, 否則要試
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12/11 11:29, , 6F
建議先從citrate pH6開始試, 再試EDTA pH8, tris-EDTA pH9
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12/11 11:29, , 7F
太強的retrieval可能會造成false positive喔
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推
12/11 21:08, , 8F
Proteinase K 也是其中一種方式!也可買Comercial kit來試
12/11 21:08, 8F
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文章代碼(AID): #1GmuYc-y (Biotech)
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