Re: [求救] cleavaged Caspase3的western
感謝各位板友提供意見
這禮拜的caspase 3 (17 kDa)已經有結果了
在這裡把我改的條件po出來給有需要的人參考
protein loading: 150 ug
將PVDF membrane裁開區分pro-caspase 3 (35 kDa)及active caspase 3 (17 kDa)
blocking: 5% BSA in TBS 4度C o/n後將BSA吸走(re-use), 不進行wash直接加1x TBS
1'Ab: rabbit anti pro-caspase 3 (#9662, cellsignal) 1:500 4度C o/n
wash: 0.1% TBST 15 min 3次
2'Ab: anti rabbit 1:2500, 室溫一小時
wash: 0.1% TBST 15 min 6次
ECL呈色
出來的band很清楚 background也蠻乾淨的
再次感謝各位板友提供的意見~~~<(_ _)>
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