[求救] 凍RAW264.7 MACROPHAGE的方法
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
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目前我凍細胞的方式如下：
將滿盤的細胞 以PBS WASH後 加入少許的MEDIUM
以刮的方式將細胞收集 隨後以離心的方式(1300RPM 30MIN 4度C)
收集細胞團並加入含5％DMSO的medium(配完即放入冰桶中)
凍細胞時間如下： 4度c 30min
-20度c 30min
-80度c overnight（16~18hr）
放入液態氮中保存
要使用前解凍 就先在37度c下回溫
然後seeding於10cm盤培養overnight
但隔天要換medium時 發現細胞都沒貼盤～～
不知道是出了什麼問題？
有去詢問當初給細胞的人 他是說 必須很小心 不能很大力的沖
但是此次作出的結果還是不會活
因此想請問是否有什麼技巧或步驟仍需要改善的？
先謝謝大家的回答！感恩～～
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