[求救] 如何利用抗體辨認純醣鏈?

看板Biotech作者 (狼凰慈威)時間12年前 (2011/10/07 19:48), 編輯推噓1(107)
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各位先進好,小弟想來求救一下, 目前實驗室需要以一支自備抗體辨認 Sialyl Lewis X, http://en.wikipedia.org/wiki/Sialyl_lewis_x 由於他是一個四醣的小分子, 已使用過 ELISA,但醣 coat 不上去, 也用過 DAS-ELISA,但效果不彰,推測可能是分子太小, 兩個不同一抗辨認位置可能有重疊,甚至根本就相同, 所以導致第二位一抗無法結合上去。 用過 Dot-Blot,但也失敗,推測可能醣分子太小穿過 membrane, membrane 我們用過 0.45um 以及 0.025um 的結果都一樣失敗。 左思右想苦無對策, 不知是否有人有以抗體辨認小分子純醣鏈的經驗? 或者是耳聞過有哪些方法的? 感謝! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 203.71.94.31

10/07 21:45, , 1F
去找看看有沒有商業化接biotin的 直接用avidin固定
10/07 21:45, 1F

10/08 02:12, , 2F
1F是指將avidin coating在底盤上 再將接有biotin的SLeX
10/08 02:12, 2F

10/08 02:14, , 3F
醣鏈加入與之結合嗎 但醣鏈接上biotin 如此一來改變了
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10/08 02:15, , 4F
結構 不知道這支自製抗體是否還能夠辨認
10/08 02:15, 4F

10/08 10:31, , 5F
通常糖修飾會在還原端 理論上前面三個糖沒被破壞
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10/08 10:31, , 6F
抗體就有機會可以辨識 你可以去查一下期刊
10/08 10:31, 6F

10/09 15:09, , 7F
好的 那看起來這個方法不錯 而且如果能自己在實驗室進
10/09 15:09, 7F

10/09 15:10, , 8F
行biotinylation 可能會更加方便 感謝!
10/09 15:10, 8F
文章代碼(AID): #1EZkS1yZ (Biotech)
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