Re: [求救] 要怎麼cloning最快

看板Biotech作者 (台南工作的基隆人)時間13年前 (2011/06/16 22:49), 編輯推噓3(302)
留言5則, 4人參與, 最新討論串2/2 (看更多)
※ 引述《spy1015 ()》之銘言: : 想請問各位,作cloning時拿去定序後 : 發現選出來insert gene有些地方序列有錯 : 請問你們會整個再從pcr開始,重新ligation : 還是把上次ligation剩下的再重新transform呢? : 我都挑不到全對的序列,已經用pfu dna polymerase了! 你的所有clone都錯同一個地方嗎 如果這樣那是原本template有錯 錯不同地方還有救 若不想重新PCR 你可以拿幾個錯不同地方的clone 剪掉他們錯的地方再接進對的序列 -- 單身不代表寂寞,寂寞是走在一個不愛妳的人身邊的時候。 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.116.253.121

06/16 23:09, , 1F
重新做template會不會比較快
06/16 23:09, 1F

06/16 23:45, , 2F
我應該會重新PCR~記得用含有校正功能的superTaq或pfu
06/16 23:45, 2F

06/17 00:14, , 3F
要用這方法要點運氣
06/17 00:14, 3F

06/17 00:14, , 4F
也要兩者之間剛好有可以切的
06/17 00:14, 4F

06/17 00:43, , 5F
會不會是基因本身高度變異的位置?
06/17 00:43, 5F
文章代碼(AID): #1D-XVmau (Biotech)
討論串 (同標題文章)
文章代碼(AID): #1D-XVmau (Biotech)