[求救] codon usage

看板Biotech作者 (火球連發~)時間14年前 (2011/06/09 16:53), 編輯推噓2(205)
留言7則, 3人參與, 最新討論串1/2 (看更多)
最近做表現實驗,使用Pichia pastoris當host異源表現fungi基因 但是經過誘導後都沒有目標蛋白產生(SDS-PAGE分析) 可是轉殖株又可以在含有抗生素的plate上生長,代表基因應該有送進去?! 懷疑是否為codon usage的問題。 序列經codon usage軟體分析(new in version 2.0)後 他有兩個選項不是很了解,分別是 relative adaptiveness 與frequency 想請問他代表的意思是?? relative adaptiveness分析後只有6個bp低於20%,7個bp低於10%,且不連續 frequency分析後有好幾個bp是低於20%與10%,比上述分析多,有些有連續 為什麼兩種方法結果不同呢?? 是不是這原因造成蛋白質部表現的阿??謝謝~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.129.35.102

06/09 18:21, , 1F
kozak sequence? in frame?
06/09 18:21, 1F

06/09 23:19, , 2F
yes
06/09 23:19, 2F

06/10 08:31, , 3F
mRNA有表現嗎?
06/10 08:31, 3F

06/10 14:48, , 4F
應該是有,我是從mRNA轉cDNA的~ Pichia中就沒有測了@@
06/10 14:48, 4F

06/10 23:11, , 5F
應該先看有沒有transcription再看translation的事吧= =
06/10 23:11, 5F

06/10 23:12, , 6F
而且pichia都商品化了codon應該不會差不然不好賣阿
06/10 23:12, 6F

06/11 12:46, , 7F
frequency我想是指這個codon在yeast內被使用的頻率
06/11 12:46, 7F
文章代碼(AID): #1Dy8ebEO (Biotech)
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