[求救] RT遇到的問題

看板Biotech作者 (Jim)時間13年前 (2011/06/08 20:10), 編輯推噓3(306)
留言9則, 4人參與, 最新討論串1/2 (看更多)
想請問板上的各位高手 因為我在做RT時,Oligo dT 和dNTP會先混在一起(各0.5ul) 接著再加1ul到各個sample 但現在遇到問題了 由於這次sample較多~因此在我各加完1 ul之後 發現混合的那管還剩下1ul,各個sample加完那1ul之後體績是6.5ul 因此我把pippet調成6.5ul去吸每個sample 發現都剛好~而我也確定我在配olgo dT+dNTP時沒有多配 那假如這部分有問題的話RT做出來會有什麼樣的影響?? 謝謝~~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 203.71.94.31

06/08 20:54, , 1F
體積這麼小 誤差很正常... 前提是你沒有少加一組就好了
06/08 20:54, 1F

06/08 23:03, , 2F
我覺得RT的成功與否跟RNA的quality比較有關...
06/08 23:03, 2F

06/08 23:04, , 3F
真的怕的話 pipet送去校正吧@@"
06/08 23:04, 3F

06/09 02:12, , 4F
一定會有誤差的..所以我們實驗室都是多配1管 省點就多半管
06/09 02:12, 4F

06/09 02:13, , 5F
每管加的量都一樣還有多 總比最後一管少了加不到來的好~
06/09 02:13, 5F

06/11 08:21, , 6F
沒有影響的,敝實驗室pipet的誤差都在2uL以上,還是可以RT
06/11 08:21, 6F

06/11 08:24, , 7F
而且RNA quality比較重要,可以跑個internal control 的PCR
06/11 08:24, 7F

06/11 08:26, , 8F
確認一下RNA qualiry
06/11 08:26, 8F

06/11 08:28, , 9F
我是說RT之後的product 啾咪
06/11 08:28, 9F
文章代碼(AID): #1DxsQdVt (Biotech)
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