Re: [求救] 請教關於蠟切與凍切問題~

看板Biotech作者telesa (空白)時間14年前 (2011/05/22 23:53)推噓1(1推 0噓 5→)

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※ 引述《yussing (藍色天空)》之銘言： : ※ 引述《mzac1b (Goodday)》之銘言： : : 發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出 : : 以方便板友幫您追蹤問題 : : ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- : : 想請教高手兩個問題~~ : : 1.一般拿來乘載組織的玻片通常有coating東西 : : 這樣的玻片可以 reuse 嗎? : : 我是說當你切完片或染完觀察 : : 發現不滿意於是 : : 把玻璃片上的組織洗掉 : : 再重新接組織 : : 我個人經驗是處理冰凍切片的組織 : : reuse 似乎影響不大 : : 不知處理蠟切實玻片 reuse 會不會有影響? : : 2.冰凍切片的脂肪組織可以進行 Oil Red O染色嗎? : : 雖然看到文獻有用 Oil Red O 染組織上的部分脂肪 : : 但我剛試染整塊脂肪 (幾乎九成以上是油脂) : : 切片 (切片厚度: 14micro meter) : : 似乎油滴會飄起 (已先福馬林固定過) : : 而且油會混在一起 : : 難以得到完整型態的染色結果 : : 所以我有點打算放棄這個實驗 : : 因為很難染得完整 : : 有人有染過或是否知道好染的方法嗎? : : 感謝不吝賜教~ 我不太懂怎樣的情況算是油混在一起? 是指看起來一整片糊糊的嗎? 我之前也試了很久，真的很難做得好，很容易整片lipid變成糊的或者是lipid染不上(可能細胞破了使lipid不見了?) 我的感覺是，切片要先想辦法切完整，可以邊切時邊用顯微鏡稍微看一下白片另外染完要封片(用水溶性膠)，不然等水分蒸發後,整個看起來都會是糊的另外，過程中亦不能用力壓玻片，會把lipid壓碎，整個tissue看起來會很髒不知道我的觀察是否正確，希望有其他強者能幫忙，謝謝 : 我之前做大鼠脂肪肝model的實驗, : 讀了一些paper, 也有請教過病理科醫師, : 因為福馬林會溶解tissue內的油滴, : 所以會建議用冷凍切片的方式染Oil red觀察. 我記得...福馬林不會溶解lipid，有機溶劑才會 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 122.121.214.88

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mzac1b

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