[求救] 用PCR clone promoter

看板Biotech作者 (我想休息...)時間15年前 (2010/10/30 13:47), 編輯推噓1(1推 0噓 4→)
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小弟我最近要用PCR將一段genomic DNA中一段promoter clone出來 但是之前試了很多condition都沒有辦法(溫度，濃度)， 想要請教板上有沒有高手做過這種實驗，可以跟我說一下大概要注意什麼嗎? 我想要clone出來的長度大概是2Kb左右 感謝!!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 120.126.78.234
推
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請搜尋一下high GC content PCR的相關文獻
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裡面常出現的方法都值得您參考
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1% DMSO, annealing 溫度用Tm -2 -0 +2去抓看看
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template 濃度 1~2ng genomic DNA /ul 假設PCR體積25ul
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放個50ng以下的genomic DNA
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文章代碼(AID): #1Cox5RbN (Biotech)
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