[求救] buffy coat的分離

看板Biotech作者 ( ><>J <>< し<><)時間15年前 (2010/10/13 11:27), 編輯推噓3(3推 0噓 12→)
留言15則, 3人參與, 最新討論串1/3 (看更多)
小弟是理工背景實驗室的同學 最近需要使用白血球進行實驗 加了heparin的血液，用3000rpm、4度c、離心15分鐘(沒有使用ficoll) 之後可以看出血液的分層 但是卻不知道要如何將buffy coat從血液中抽出來 其實我也不是很確定我以為是buffy coat的東西到底是不是buffy coat 應該是離心後中間那層很薄的灰白色層吧? 想請問各位前輩有甚麼方法可以將buffy coat給分離出來 另外，buffy coat分離出來是甚麼樣的狀態? 是液體，還是一片膠狀的東西? 因為看到某處的操作說明說buffy coat如果夠堅固的話，可以將整片buffy coat挑起 由於實驗室的學長姐也沒使用過白血球做實驗，對這些實在不清楚 希望各位前輩可以給予指教 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.114.202.176 ※ 編輯: Feting 來自: 140.114.202.176 (10/13 11:33)
推
10/13 11:38, , 1F
buffy coat只是細胞因為離心積成的..
10/13 11:38, 1F
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10/13 11:39, , 2F
一般來說都是用滴管先把上面的血漿吸掉..
10/13 11:39, 2F
推
10/13 15:09, , 3F
有時sample狀況不一定~常會出現不明顯的buffy coat~
10/13 15:09, 3F
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10/13 15:12, , 4F
就固定依sample比例取多少的中間層,多少都會吸到plasma
10/13 15:12, 4F
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10/13 15:17, , 5F
我有用ficoll~會在plasma跟ficoll中會看到薄薄白色層
10/13 15:17, 5F
推
10/13 16:17, , 6F
我是用3000rpm、4度c、離心20分鐘(沒有使用ficoll)
10/13 16:17, 6F
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10/13 16:18, , 7F
把drop直接伸進去吸取中層(多少會吸到一些血漿和紅血球)
10/13 16:18, 7F
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10/13 16:19, , 8F
buffy coat的厚薄和易取度因人而異，有的很厚有的很薄
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10/13 16:20, , 9F
有的很容易整片就被吸起來 有的卻跟下層黏很緊 需要技巧
10/13 16:20, 9F
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10/13 16:20, , 10F
我分出來的buffy coat多少都還是會帶紅血球 所以是
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紅紅的液體 不知道這樣有沒有幫助 PS我在醫院的研究室
10/13 16:21, 11F
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10/13 16:22, , 12F
幫忙收集檢體 聽說申請者回去還會用其他方法把紅血球
10/13 16:22, 12F
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10/13 16:22, , 13F
溶破 所以當初教我的前輩說儘量不要吸到紅血球 但多少
10/13 16:22, 13F
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10/13 16:23, , 14F
有一點還是沒關係 (我非檢體使用者 所以不知buffy coat)
10/13 16:23, 14F
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10/13 16:24, , 15F
如果帶一些紅血球 對實驗有無影響 就要請問版上前輩了)
10/13 16:24, 15F
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文章代碼(AID): #1CjISi1n (Biotech)
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