Re: [討論] 請問Western Blotting membrane可以剪嗎?

看板Biotech作者 (六百)時間15年前 (2010/09/24 20:47), 編輯推噓0(005)
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不是可不可以剪的問題 而是 不管剪不剪 一張 membrane 上該有的東西都要有 的問題 有 internal control 是最好 要不然就是剪出來的每一條 membrane 上都要有配 control lane 另外最好也都要有 marker --- 其實比較好的想法是 不是剪 membrane, 而是 "併 membrane" 比方說你原本要 load 五個 well(包含 control, marker) 跑出來染兩個抗體 但是你的 gel 有 10 well 那當然可以 load 雙份然後跑完剪開 各自去染不同的抗體 但是你不能說每個 sample load 兩個 well, 跑完剪成一條一條拿去染 至少需 publish quality 的東西不行 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 71.10.75.57

09/25 00:47, , 1F
可是這樣無法排除人為刻意或非刻意的loading誤差 而若是
09/25 00:47, 1F
這就不是剪不剪 membrane 會影響的啦 要靠 internal control 或所有 membrane 作完都拿去染 coomassie blue

09/25 00:50, , 2F
western sample數不會太少 一般mini gel才10 well 能跑
09/25 00:50, 2F

09/25 00:50, , 3F
兩份的機會應該不多
09/25 00:50, 3F
看原 po 狀況吧 他說的 以剪開membrane 拿去染不同抗體 取代 stripping 所以我預設 gel 夠給每個 sample load 多份 不然沒道理 sample 1-8 跑完,剪開,1-4 拿去染抗體 A, 2-8 拿去染抗體 B 吧?

09/25 00:52, , 4F
還有一般裁membrane不會裁太靠近 應該不會只裁1條lane這麼
09/25 00:52, 4F

09/25 00:53, , 5F
精細的裁切才對
09/25 00:53, 5F
※ 編輯: boblu 來自: 131.212.202.90 (09/25 03:30)
文章代碼(AID): #1Cd9tEik (Biotech)
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