Re: [求救] 請問EMSA使用的probe

看板Biotech作者 (男的啦)時間16年前 (2010/02/02 20:06), 編輯推噓0(004)
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※ 引述《deliciosa (I HOPE...)》之銘言: : 請教大家一個有關EMSA的問題。 : 因為現在我必須要在動物組織中證明,某一個transcription factor(CREB) : 與BDNF promoter有結合。所以想使用EMSA證明 (Panomics)。 : 但在詢問產品專員的結果是還要另外請人合成一段biotin-labled : BDNF promoter ds sequence。 : 那這樣不就等於 只是證明CREB與BDNF promoter有(無)結合;但並非用來證實 : 在我的實驗condition之下,CREB 的確有(無)與BDNF promoter結合。 ㄜ...我看不懂這兩句話有什麼差別 : 所以現在是不是必須要自己設計primer,然後將tissue中的BNDF promoter sequece : 放大並lable上biotin。 : 麻煩各位幫我解答,謝謝! 若不需要知道確切的結合位置 其實用CHIP就夠了 用PCR放大?我沒看過有人做EMSA的probe是用PCR放大的ㄝ -- http://www.wretch.cc/blog/aggaci MSN : blueaggaci@hotmail.com -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 122.121.207.32

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PCR可加biotin-dUTP來做Labeling
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02/03 15:12, , 2F
這我當然知道,只是用那麼長的probe作EMSA我實在不知道這
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CHIP差在哪? 頂多CHIP是看整個promoter的差別而已
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02/03 15:16, , 4F
再說畢竟biotin-dUTP不=dTTP 會不會影響結合也不知道...
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文章代碼(AID): #1BQ1Kf_1 (Biotech)
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