[求救] 請問EMSA使用的probe

看板Biotech作者 (I HOPE...)時間16年前 (2010/02/02 17:48), 編輯推噓1(1推 0噓 1→)
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請教大家一個有關EMSA的問題。 因為現在我必須要在動物組織中證明，某一個transcription factor(CREB) 與BDNF promoter有結合。所以想使用EMSA證明 (Panomics)。 但在詢問產品專員的結果是還要另外請人合成一段biotin-labled BDNF promoter ds sequence。 那這樣不就等於 只是證明CREB與BDNF promoter有(無)結合；但並非用來證實 在我的實驗condition之下，CREB 的確有(無)與BDNF promoter結合。 所以現在是不是必須要自己設計primer，然後將tissue中的BNDF promoter sequece 放大並lable上biotin。 麻煩各位幫我解答，謝謝！ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.116.60.98
推
02/02 18:50, , 1F
用PCR放大 做EMSA用EtBr染DNA就好 不一定要label biotin
02/02 18:50, 1F
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02/02 18:53, , 2F
是DNA用量需要高一點 50ng即可肉眼觀察
02/02 18:53, 2F
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文章代碼(AID): #1BP_JpEF (Biotech)
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