[求救] 目標蛋白無法以Pichia異源表現
大家好
最近在做異源表現的實驗
使用的是 Pichia 表現系統
表現的是我們實驗室發現的免疫調節蛋白 分子量約 13 kD
之前的學姊用 Pichia pastoris KM71 表現的時候就遇到無法表現的問題
目前我試過 Pichia angusta (Hansenula polymorpha) 和 P.pastoris KM71H
兩種 host 也都無法順利表現 = =
因為類似的蛋白做過很多 也都可以成功表現
所以我想應該不是誘導不成功的問題 (我用1% MeOH 誘導)
目前推測可能是 codon usage 的問題
但我比對了一下 並沒有連續低於10%的 codon
甚至其實都是很高 %
實在是不知道還有什麼原因造成無法表現 = =
只好來請問各位前輩有沒有類似的經驗?
以及可能的原因?
謝謝
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.74.19
討論串 (同標題文章)
以下文章回應了本文：
完整討論串 (本文為第 1 之 2 篇)：