[討論] microinjection 的問題
近來我要把一個大約7500bps的plasmid 放進斑馬魚的胚胎中表現
首先我linearize了那個plasmid (大概7500bps)
purify了之後就與純水和phenol red 混合在一起
把混合物打進斑馬魚的胚胎中
24小時後在顯微鏡下觀察螢光蛋白的表現情況
可是我做了幾次都沒有什麼東西表示出來
反而有一次直接把plasmid打進斑馬魚的胚胎中, 40個胚胎宥1, 2個表現了那個螢光蛋白
可是那個螢光是很弱的
是不是我用錯了restriction enzyme 去linearlize那個plasmid呢?
還是因為那個linearized plasmid 太長而在魚中degrade了呢?
有沒有人知道microinjection最多可打多大size的plasmid呢?
謝謝各位的解答!!!
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