Re: [求救] 請問誰有MCF-7細胞 (台中)
之前查資料,內容有提到說MCF-7解凍初期易懸浮,
當我解凍後24h要離心去掉DMSO,
這時顯微鏡下看到的細胞都是飄的,離心後也不見有細胞被離下來,
這樣是否可以判斷其實是細胞死了呢?
我使用的medium是MEM+10%FBS+1%Pen/Strep
※ 引述《greedman89 (天堂地獄)》之銘言:
: ※ 引述《mito0222 (MISA)》之銘言:
: : 我們實驗室 過去都是用High glucose DMEM+10%FBS+1% PENN/STRIP.
: : 問題是 現在解凍的都不太長 細胞型態很奇怪
: : 還會出現怪怪的東西 但是確定培養基沒有污染
: : 或是分盤之後漸漸死去
: 依我們實驗室的方法來看其實DMEM(Dulbecco's Modified Eagles Medium)
: 買Hi-D-GLUCOSE & Hi-L-glutamine的 在自行加上 1%的L-glutamine
: 還有1%的Pen/Strep 還有可以加入1% Sodium Pyruvate
: 這樣應該就可以養得起來了
: 另外就是就算是同一家做出來的血清可是因為是不同批的關係也會造成
: 細胞培養的差異所以像我們家的話就會盡量大量進貨
: 至於有沒有污染我想Mycoplasma最好還是驗一下看看用新的dish或是75T
: 隨便然後拿新的medium裝在裡面放到培養箱放個兩天然後拿去
: 驗看看會比較保險因為其本身也有些抗藥性尤其是盤尼西林(penicillin)
: 還有一個考量的點就是培養基的pH值基本上都以中性為主
: 7.2 - 7.3,可以倒一點出去用pH meter量量看基本上如果是買已經
: 泡好的培養基那個它應該都已經調好了,但如果是要自己泡的那就
: 要多注意一些了。不才的見解參考看看吧︿︿
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.113.226.88
推
11/11 19:55, , 1F
11/11 19:55, 1F
推
11/11 21:02, , 2F
11/11 21:02, 2F
推
11/12 01:20, , 3F
11/12 01:20, 3F
討論串 (同標題文章)