[求救] Coating Matrigel的疑問
各位好~
我要做invasion assay,但是一直沒辦法很穩定地把matrigel coating好,
常常會有細胞集中在中間的情況,可能是gel黏在外圍,導致中間有凹陷。
我目前coating的方法:
1. 就每一well而言,將3ul matrigel稀釋在100ul的純水中。
2. 稀釋均勻後加入transwell中,自然風乾或是包好放進烘箱乾燥。
3. 放冰箱保存,之後直接使用。
我觀察到液面會因為附著力大於內聚力,而有凹面產生,是否因為這樣導致
gel呈現盆地地形,所以細胞才會集中在中間?
另一種方法是直接把十分之一稀釋的matrigel加進去(30ul),可是這種方式一樣
容易發生gel黏聚外壁的情形。
另外,有的protocol會寫 "After coating, aspirate excess matrigel" 那是指什麼?
讓matrigel沉澱然後吸掉上清液的意思嗎?
請問我的作法要如何改進? 希望高手們分享自己的經驗和做法,感謝回答!
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