Re: [求救] miRNA 的cloning
其實可以不用這樣啦~~
可是試著在target RNA兩段加以隻序列的linker就好了阿
※ 引述《peggy814 ( )》之銘言：
: 最近準備要作miRNA的實驗
: 老闆是打算自己clone miRNA的 construct
: 看了paper之後
: 他們是clone pre-miRNA insert由PCR得到
: paper上使用的PCR primer是根據pre-miRNA的sequence
: 設計overlapping的primer
: forward和reverse的primer分別大概是60~80 mer
: 我找了幾個paper裡面所clone的miRNA
: 對了miRBase裡面的sequence之後
: 只能看出forward和reverse primer大概有overlap十幾二十個mer
: (不同的miRNA overlap程度不同)
: 想請問如果我要設計primer的話
: 是只要forward和reverse primer有overlap到就可以了嗎?
: 還是有其他的需要注意?
: 謝謝^^
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