[求救] Western Blotting的問題

看板Biotech作者sjacky (陳小文)時間16年前 (2009/04/15 19:35)推噓8(8推 0噓 1→)

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工作關係，開始接觸Western 剛開始學習，目前還算順利其中遇到一個問題 SDS-PAGE->Transfer->1st Antibody->2nd Antibody->壓片目前完整流程大概做了9次左右其中有兩次，壓片後，連Marker都無法顯示出來我使用兩種Marker，一種是在SDS-PAGE上可顯示的，另一種是壓片時可在底片上顯示其中一次，是我在壓片時，第一次有壓出來，第二次時底片不小心跟Mambrane接觸到我在用Santa Cruz的substrate，我在把Mambrane再與substrate作用一次結果，後面怎麼壓都是空白，連應該要顯示的Marker也沒有另外一次，則是substrate的A、B液要混合時，比例應該是1：1 結果因為B液快用完了，所以大概比例是1：2/3 與Mambrane作用後，進行壓片，結果也是連基本要出現的Marker都沒有顯示出來其餘之前所進行的Western都很正常麻煩請各位幫我看看，若有不詳盡的部份，請各位提點，謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 61.64.22.9

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iiidns

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bluecsky

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blence

04/15 22:34, , 3^F

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