Re: [求救] 請教如何分離死亡與健康的懸浮式細胞?
※ 引述《AronYA ( )》之銘言:
: 利用 Lenti virus 做 RNAi實驗
: 再做puromycine篩選
: 我的細胞株是懸浮式的
: puro.篩後 細胞每次繼代
: 凋亡或者不健康的細胞在離心時
: 都會跟健康的細胞一起離下來
: 進而影響繼代的品質
: 想請教有沒有人知道要利用那種溶液
: 可以將懸浮式細胞的 凋亡細胞 以及 健康細胞 分離開
: 麻煩各位了 ~
上面推文是說可以用反覆的離心方式( 離心->去上清->回溶->recycle )
我是沒有做過懸浮細胞
但是如果懷疑這種方式是否可以分離健康和不健康的細胞
我認為可以測試每次離心後的存活細胞比例
如 :
每次離心後將重新懸浮的細胞液取一點出來
再利用trypan blue計數存活及死亡的細胞比例
看看是否每次離心及再回溶的細胞液是否能增加健康的細胞比例
如果可以,再斟酌要離幾次(太多次應該是會loss細胞及花費太多時間)
有錯的話請多多指教~~ 謝謝
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