Re: [求救] Western 的band糊糊的

看板Biotech作者 (ㄟ逼)時間15年前 (2009/04/08 20:25), 編輯推噓10(10推 0噓 4→)
留言14則, 12人參與, 5年前最新討論串2/3 (看更多)
※ 引述《abbyyam (ㄟ逼)》之銘言： : 小弟最近做Western遇到的困擾是我的Target protein的band都糊糊的 : 不夠shape，所以讓老闆非常的不滿 : 但是在actin的部分就很OK : 我的target protein的大小是50~55kDa左右 : 膠用過10%和12%的 : Transfer是400mA 2.5hr (in ice bath) : 所以到底是哪邊出了問題呢? : 煩請幫忙　> < http://www.wretch.cc/album/album.php?id=abbyyam&book=12 圖在此 另外我跑膠是用80V和100V在跑的 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 203.64.247.100
推
04/08 20:30, , 1F
你的SDS-PAGE用CBR stain的image ??
04/08 20:30, 1F
推
04/08 20:40, , 2F
蛋白量太多- -
04/08 20:40, 2F
推
04/08 21:02, , 3F
是glycoprotein嗎? 若是的話. 也有可能是這樣的
04/08 21:02, 3F
推
04/08 22:28, , 4F
是用底片壓片的嗎?
04/08 22:28, 4F
推
04/08 22:28, , 5F
不錯漂亮阿
04/08 22:28, 5F
→
04/09 16:09, , 6F
是用照的不是用壓片的
04/09 16:09, 6F
推
04/09 20:02, , 7F
我也覺得蛋白量過多耶
04/09 20:02, 7F
推
04/10 08:45, , 8F
我用過冷光儀照相及壓片 覺得壓片還是比較sharp哩
04/10 08:45, 8F
推
04/10 10:35, , 9F
先不管照相與壓片優劣,我看到很多會照相模糊都是focus跑掉
04/10 10:35, 9F
→
04/10 10:39, , 10F
使用者往往先照相而忘記確認,或根本不知道冷光儀有對焦的事
04/10 10:39, 10F
推
04/10 11:30, , 11F
會不會你的protein其實有很多個isoform呀?
04/10 11:30, 11F
推
08/10 22:51, , 12F
試著下不同蛋白量吧 由高至低 看蛋白量低時是否會變sharp
08/10 22:51, 12F
→
11/11 01:23, , 13F
不錯漂亮阿 https://daxiv.com
11/11 01:23, 13F
→
01/03 16:53, 5年前 , 14F
會不會你的protei https://noxiv.com
01/03 16:53, 14F
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文章代碼(AID): #19t9UsAM (Biotech)
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