Re: [求救] HSP90 acetylation??
※ 引述《cytospin (美國闖蕩中)》之銘言：
目前對於HDAC inhibitor並沒有很直接的證據
證明它具有特異性
所以是否在不同的細胞中會有所差異 目前並不得而知
但是在一些PAPER中 如Clin Cancer Res. 2007 Aug 15;13(16):4882-90.
中提到 它使用的濃度是nM 時間點不超過八個小時 它可以看到HSP90 有acetylation
當然不同的inhibitor是否會有不同的結果 還不清楚
希望這對原PO有幫助!!
: ※ 引述《cytospin (美國闖蕩中)》之銘言：
: : 事情是這樣開始的
: : 原本我在做HSP90 後來開始做HDAC inhibitor
: : 看paper說 HDACinhibitor不只會導致H3, H4,tubulin acetylation
: : 其他target包含了 STAT3, and HSP90
: : 所以我就做了這相關的實驗
: : 可是我怎麼treat細胞 with HDACinhibitor
: : HSP90 and sTAT3都沒有acetylation.... (我用direct and IP western測過)
: : 用的抗體是cell signalign的 anti-Act=lysine
: : 請問一下有誰有經驗的嗎??
: : 給小妹一點指點
: 在寫清楚一點
: 同樣的時間點和condition Act-H3, H4 and tubulin都很強
: HSP90 acetylation and state3 我都是用同個時間點 也就是24 hours
: 濃度是0.5 and 1 uM 也看到disassociation of HSP90 Vs client protein
: 就卡在甚麼都做不出來 HSP90 有acetylation...
: direct western的時候我total protein放了100 ug
: IP的時候我用2x10^7 cell做的
: 請賜教
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