Re: [求救] HSP90 acetylation??
※ 引述《cytospin (美國闖蕩中)》之銘言：
: 事情是這樣開始的
: 原本我在做HSP90 後來開始做HDAC inhibitor
: 看paper說 HDACinhibitor不只會導致H3, H4,tubulin acetylation
: 其他target包含了 STAT3, and HSP90
: 所以我就做了這相關的實驗
: 可是我怎麼treat細胞 with HDACinhibitor
: HSP90 and sTAT3都沒有acetylation.... (我用direct and IP western測過)
: 用的抗體是cell signalign的 anti-Act=lysine
: 請問一下有誰有經驗的嗎??
: 給小妹一點指點
在寫清楚一點
同樣的時間點和condition Act-H3, H4 and tubulin都很強
HSP90 acetylation and state3 我都是用同個時間點 也就是24 hours
濃度是0.5 and 1 uM 也看到disassociation of HSP90 Vs client protein
就卡在甚麼都做不出來 HSP90 有acetylation...
direct western的時候我total protein放了100 ug
IP的時候我用2x10^7 cell做的
請賜教
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