[求救] transfection的疑問
材料+步驟:
目標DNA 16 ug
VSVG 4 ug
gag-pol 12 ug
GFP 1.87 ug
CaCl2 100 ul
加入auto ddH2O到1000ul
將所有的東西混合 再加入2X BBS 1000ul 反應約10分鐘
加到約長8分滿的293T細胞(有8ml medium)中
問題:
1.想請教各位大大們 使用retrovirus做transfection
cell是不是一定會出現萎縮或死亡的現象呢? 萎縮是不是代表cell死掉了?
2.做了四次感覺很能難穩定cell狀況 有一次control的cell狀況良好且能看到螢光
可是實驗組的cell就萎縮和死亡 不然就是發生cell死亡+汙染
不知道用電的方式效率會不會比較高且穩定?
3.我的目標是要用retrovirus去infect U2OS cell
這樣還適合用電的方式做transfection嗎?
新手上路請大大們多多指教 有很多還不是很懂 不對或缺漏的地方請告知小弟
一定馬上改進 謝謝大大~
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10/26 20:33, , 1F
10/26 20:33, 1F
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