Re: [求救] flow cytometry的問題
我有遇過一模一樣的問題,
買BD的抗體,搞了半天都搞不定。
結論是BD每種抗體跟每個LOT的濃度都不一樣,
isotype跟專一性抗體濃度差很多,
可能差到十幾倍以上。
打電話去問一下該批的濃度,
把iso跟專一抗體濃度調整成一樣就好了。
另外部分廠牌包裝開始會把濃度寫在外面。
我有不爽打電話去BD抗議過,因為問這個濃度要他們去轉問,
都要花上一兩天的時間。
他們說大部分使用上沒有這個問,並基於每批conjugate 螢光的程度不太一樣,
所以出廠的時候濃度調整的的程度不一,
改變包裝標示麻煩,所以不考慮標上去。
※ 引述《tcmakol ()》之銘言:
: 之前做flow時 自己接一抗二抗
: 都會做一組negative conrtol(不加一抗只加二抗)跟實驗組比
: 都可以看到明顯的向右移有 shift的情形
: 然後後來買了廠商接好的一抗帶螢光
: 也是做一組negative conrtol(用isotype)跟實驗組比
: 卻發現有shift的情形 但是卻是向左移
: 比negative control表現量還要少
: 同樣的細胞以及組別跟設定
: 但結果卻是向左移 做了好幾次了 都是同樣的結果
: 想請問各位高手 這樣是哪裡出了問題呢
: 拜託各位高手了
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09/30 13:13, , 1F
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