Re: [求救] flow cytometry的問題

看板Biotech作者 (cometoseeme)時間17年前 (2008/09/30 02:42), 編輯推噓1(100)
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我有遇過一模一樣的問題, 買BD的抗體,搞了半天都搞不定。 結論是BD每種抗體跟每個LOT的濃度都不一樣, isotype跟專一性抗體濃度差很多, 可能差到十幾倍以上。 打電話去問一下該批的濃度, 把iso跟專一抗體濃度調整成一樣就好了。 另外部分廠牌包裝開始會把濃度寫在外面。 我有不爽打電話去BD抗議過,因為問這個濃度要他們去轉問, 都要花上一兩天的時間。 他們說大部分使用上沒有這個問,並基於每批conjugate 螢光的程度不太一樣, 所以出廠的時候濃度調整的的程度不一, 改變包裝標示麻煩,所以不考慮標上去。 ※ 引述《tcmakol ()》之銘言: : 之前做flow時 自己接一抗二抗 : 都會做一組negative conrtol(不加一抗只加二抗)跟實驗組比 : 都可以看到明顯的向右移有 shift的情形 : 然後後來買了廠商接好的一抗帶螢光 : 也是做一組negative conrtol(用isotype)跟實驗組比 : 卻發現有shift的情形 但是卻是向左移 : 比negative control表現量還要少 : 同樣的細胞以及組別跟設定 : 但結果卻是向左移 做了好幾次了 都是同樣的結果 : 想請問各位高手 這樣是哪裡出了問題呢 : 拜託各位高手了 -- 過去的來不及追憶 現在的趕不及接受 得到的不懂得珍惜 失去的無法能忘記 這就是生活嗎?! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 118.166.194.219

09/30 13:13, , 1F
每一個LOT都要做titration 而且要用濃度單位
09/30 13:13, 1F
文章代碼(AID): #18uI6KXL (Biotech)
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