[求救] flow cytometry的問題

看板Biotech作者時間15年前 (2008/09/26 18:31), 編輯推噓4(405)
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之前做flow時 自己接一抗二抗 都會做一組negative conrtol(不加一抗只加二抗)跟實驗組比 都可以看到明顯的向右移有 shift的情形 然後後來買了廠商接好的一抗帶螢光 也是做一組negative conrtol(用isotype)跟實驗組比 卻發現有shift的情形 但是卻是向左移 比negative control表現量還要少 同樣的細胞以及組別跟設定 但結果卻是向左移 做了好幾次了 都是同樣的結果 想請問各位高手 這樣是哪裡出了問題呢 拜託各位高手了 -- http://www.wretch.cc/blog/tcmakol -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 203.64.247.100

09/26 20:46, , 1F
我剛剛看了DATA sheet...懷疑他接的不是FITC
09/26 20:46, 1F

09/26 20:50, , 2F
這是他接的螢光↓
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09/26 20:52, , 4F
492/517 nm似乎不是FL1~FL3可用的,建議你把賣你抗體
09/26 20:52, 4F

09/26 20:53, , 5F
廠商叫來問~ (其實我也不是很確定啦XD)
09/26 20:53, 5F

09/26 20:58, , 6F
而且你染的會往左移相當合理,492的確比FL1的525還小
09/26 20:58, 6F

09/26 21:00, , 7F
故你染到的細胞maybe就會往左(小)移!這也是我的猜測啦= =+
09/26 21:00, 7F

09/26 21:32, , 8F
檢查過FSC/SSC嗎?
09/26 21:32, 8F

09/26 21:38, , 9F
有檢查過...gate也是gate我要的細胞
09/26 21:38, 9F
文章代碼(AID): #18tBdtc_ (Biotech)
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