[求救] 有關於SDS-PAGE transfer 的問題

看板Biotech作者 (希望夢想成真)時間17年前 (2008/09/23 19:54), 編輯推噓3(3推 0噓 3→)
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有一個問題想向大家請教一下 我們實驗室是利用半乾式轉置槽做protein 轉置到membrane 發現到一個很怪的現像 蛋白質sample為細胞total protein 所以理論上大到小都有 1. 我們把轉置完的sds-page 拿去染色 發現到大分子量的蛋白質 大部分留在membrane上 但小分子量的protein都是乾乾淨淨的 甚至放在最下層的3M paper 有發現protein marker的存在 請問各位專家 實驗到底發生什麼樣的事情~@@ 請大家給點建議~~謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.113.173.43
推
09/23 20:07, , 1F
轉漬？
09/23 20:07, 1F
推
09/23 20:12, , 2F
protein大小的差異，如果目標蛋白分子量大一點(>100kD)
09/23 20:12, 2F
→
09/23 20:13, , 3F
我會延長transfer時間10%~20%
09/23 20:13, 3F
推
09/23 20:42, , 4F
transfer太久小分子亮的protein會跑過membrane..
09/23 20:42, 4F
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09/23 20:42, , 5F
不過還是要看你membrane材質(孔徑)
09/23 20:42, 5F
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09/23 20:42, , 6F
量- -
09/23 20:42, 6F
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文章代碼(AID): #18sDaBqL (Biotech)
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