Re: [求救] insert切不出來

看板Biotech作者 (朝目標邁進)時間17年前 (2008/09/21 18:53), 編輯推噓2(201)
留言3則, 3人參與, 最新討論串2/2 (看更多)
※ 引述《rita1986 (朝目標邁進)》之銘言: 已經將 target sequence clone 到 pGEM-T-easy 有定序過序列和 cut site 都沒問題 但做 digest 時一直切不出 insert 兩端都是 BglII 的切位 確認過 enzyme 和抽 mini 的 plasmid size 是沒問題的 想請問會不會是我的切位附近的序列會形成啥結構或被修飾 才切不了 有可以預測的程式嗎 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.129.77.148

09/21 17:34,
有放positive control嗎? 確認enzyme或buffer沒問題
09/21 17:34
有拿確定可切出 band 的 plasmid 確認過 enzyme 和 buffer 沒問題 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 61.217.128.229

09/21 20:17, , 1F
plasmid抽完,保存液是什麼? 純水? TE?
09/21 20:17, 1F

09/21 21:07, , 2F
是純水
09/21 21:07, 2F

09/23 11:05, , 3F
如果是PCR完的產物clone到vector裡應該不會有修飾作用吧
09/23 11:05, 3F
文章代碼(AID): #18rYUkfW (Biotech)
文章代碼(AID): #18rYUkfW (Biotech)