[求救] insert切不出來

看板Biotech作者 (朝目標邁進)時間17年前 (2008/09/21 16:40), 編輯推噓2(2推 0噓 1→)
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已經將 target sequence clone 到 pGEM-T-easy 有定序過序列和 cut site 都沒問題 但做 digest 時一直切不出 insert 兩端都是 BglII 的切位 確認過 enzyme 和抽 mini 的 plasmid size 是沒問題的 想請問會不會是我的切位附近的序列會形成啥結構或被修飾 才切不了 有可以預測的程式嗎 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.129.77.148
推
09/21 17:34, , 1F
有放positive control嗎? 確認enzyme或buffer沒問題
09/21 17:34, 1F
推
09/21 19:25, , 2F
請問你的insert多大?gel確認時有沒可參照未切的位置?取多少
09/21 19:25, 2F
→
09/21 19:27, , 3F
切跑plasmid? 是如何,gel與%? 來確認BglII切完的結果?
09/21 19:27, 3F
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文章代碼(AID): #18rWX-c_ (Biotech)
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