※ 引述《aDnEgVeIlL.bbs@ptt.cc (觀察者)》之銘言:
> 先說enzyme好了,我用的DNA polymerase來就是擺-20度,量少大家也就沒分裝,每次
> 拿出來都直接取,不過看起來都還是液態,不曉得是否有加所謂的"抗凍劑"
對
通常是 glycerol
> 現在回到antibody上,而且是要冰-20度的那種。
> 我不曉得antibody是否像我用過的polymerase一樣也可以保持液態,如果會凝固的話,
> 我想分裝應該是絕對必要的手段,不過如果是可以保持液態的話,大家是否還會另外
> 分裝呢?要如何知道有沒有抗凍呢?
看 datasheet 上面會寫這隻抗體是溶在什麼東西裡面
有 glycerol 的就是可以在 -20C 維持液態的
> 另外一個問題就是假設買來的antibody就有50ul,可是做一次western就只要1ul甚至
> 不到(因為稀釋比在10000以上),請問這樣要怎麼分裝呢?
> 總不能拿50個PCR用的小eppendorf分裝再塞得整盒都只有一種antibody吧?
分成十個 5uL 或者是 五個 10uL 冰在 -20C
用的時候拿一管出來 解凍 取用你需要的量
剩下來的放 4C
或者是 用的時候拿一管出來 解凍 整個泡成 working 的濃度
(用 BSA 或是 normal serium, 不要用牛奶, NaN3 自己斟酌) 用剩下的放 4C
抗體在 4C 只要不長東西 維持半年通常沒問題
基本上根據個人經驗與迷信
5% normal serium + 0.01% NaN3 的抗體 working solution = 4C 金剛不壞
或者是 用的時候拿一管出來 解凍 用買來專門溶一抗的 buffer 配好
用剩下的放 4C, 甚至有些 buffer 號稱泡出來可以放室溫幾個月
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